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二手液質聯用儀LC-MS配置優選原則

更新時間:2022-07-13  |  點擊率:1807

二手液質聯用儀LC-MS以液相色譜作為分離系統,質譜為檢測系統。將色譜對復雜樣品的高分離能力,與MS具有高選擇性、高靈敏度及能夠提供相對分子質量與結構信息的優點結合起來。LC-MS主要可解決:不揮發性化合物分析測定;極性化合物的分析測定;熱不穩定化合物的分析測定;大分子量化合物(包括蛋白、多肽、多聚物等)的分析測定等。本文由京科瑞達二手儀器分享一下 二手液質聯用儀LC-MS配置優選原則 ,期望對您有所幫助!


1.接口的優選原則


ESI適合于中等極性到強極性的化合物分子,特別是那些在溶液中能預先形成離子的化合物和可以獲得多個質子的大分子;


APCI不適合可帶多個電荷的大分子,其優勢在于弱極性或中等極性的小分子的分析。


2.正、負離子模式的優選原則


正離子模式:適合于堿性樣品,可用乙酸或甲酸對樣品加以酸化。樣品中含有仲氨或叔氨時可優先考慮使用正離子模式。


負離子模式:適合于酸性樣品,可用氨水或三乙胺對樣品進行堿化。樣品中含有較多的強伏電性基團,如含氯、含溴和多個羥基時可嘗試使用負離子模式。


3.流動相的優選原則


常用的流動相為甲醇、乙腈、水和它們不同比例的混合物以及一些易揮發鹽的緩沖液,如甲酸銨、乙酸銨等,還可以加入易揮發酸堿如甲酸、乙酸和氨水等調節pH值。


二手LC-MS接口避免進入不揮發的緩沖液,避免含磷和氯的緩沖液,含鈉和鉀的成分應<lmmol/l。(鹽分太高會抑制離子源的信號和堵塞噴霧針及污染儀器)含甲酸(或乙酸)<2%。含三氟*酸≤0.5%。含三乙胺<l%。含醋酸銨<10一5 mmol/l。


送樣前一定要把握好LC條件,能夠基本分離,緩沖體系符合MS要求。


4.流量和色譜柱的優選原則


不加熱ESI的上佳流速是1—50ul/min,應用4.6 mm內徑LC柱時要求柱后分流,目前大多采用 l—2.1 mm內徑的微柱,TIS源建議使用200—400ul/min


APCI的上佳流速~lml/min,常規的直徑4.6mm柱zui合適。


為了提高二手LC-MS分析效率,常采用< 100 mm的短柱(此時UV圖上并不能獲得*分離,由于質譜定量分析時使用MRM的功能,所以不要求各組分沒有*分離)。這對于大批量定量分析可以節省大量的時間。


5.輔助氣體流量和溫度的優選原則


霧化氣對流出液形成噴霧有影響,干燥氣影響噴霧去溶劑效果,碰撞氣影響二級質譜的產生。


操作中溫度的選擇和優化主要是指接口的干燥氣體而言,一般情況下選擇干燥氣溫度高于分析物的沸點20℃ 左右即可。對熱不穩定性化合物,要選用更低的溫度以避免顯著的分解。


選用干燥氣溫度和流量大小時還要考慮流動相的組成,有機溶劑比例高時可采用適當低的溫度和流量小一點的。

 

 

 

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