二手島津液相色譜儀在化學(xué)分析、生物制藥等眾多領(lǐng)域應(yīng)用廣泛,其精準(zhǔn)的分析能力離不開規(guī)范的操作流程。
開機(jī)前,需先檢查儀器的外觀有無損壞,各連接管路是否通暢、無破損,確保流動相充足且符合實驗要求。同時,檢查電源接線是否穩(wěn)固,地線連接良好,防止因漏電引發(fā)危險。
開啟儀器時,先打開計算機(jī),再打開液相色譜儀的電源開關(guān)。等待儀器自檢完成,這一過程中要留意儀器是否有異常報警提示。接著,啟動色譜工作站軟件,進(jìn)入操作界面,此時可根據(jù)實驗需求設(shè)置相關(guān)的參數(shù),如檢測波長、流速、進(jìn)樣量等。檢測波長的設(shè)定需依據(jù)待測物質(zhì)的特性,選擇其在紫外或可見光區(qū)有最大吸收的波長,以便獲得最佳的檢測靈敏度。流速則要根據(jù)色譜柱的規(guī)格和樣品的性質(zhì)來確定,一般常見的流速范圍在0.5-2ml/min之間。

流動相的配置至關(guān)重要,要嚴(yán)格按照實驗配方,精確稱取或量取各種溶劑,充分混合均勻,并通過超聲波脫氣處理,避免流動相中存在氣泡,因為氣泡可能會影響基線穩(wěn)定性和分離效果。在將流動相倒入儲液罐時,要注意避免液體濺出,且要保證儲液罐的蓋子密封良好。
安裝色譜柱時,要確保柱接頭干凈、無雜質(zhì),然后將色譜柱小心地接入儀器,擰緊接頭螺母,但不可過度用力,防止損壞色譜柱。新安裝的色譜柱可能需要先進(jìn)行柱平衡操作,即用流動相沖洗一段時間,使色譜柱內(nèi)的環(huán)境穩(wěn)定,通常沖洗時間為15-30分鐘。
進(jìn)樣環(huán)節(jié),若使用自動進(jìn)樣器,需先將樣品瓶放置好,設(shè)置好進(jìn)樣順序和次數(shù)等參數(shù)。手動進(jìn)樣時,則要小心地將樣品注入進(jìn)樣閥,注意進(jìn)樣量的準(zhǔn)確性和進(jìn)樣速度的穩(wěn)定性。樣品注入后,液相色譜儀便開始運(yùn)行,分離過程隨之啟動。
在儀器運(yùn)行過程中,要密切關(guān)注基線的變化,若基線出現(xiàn)漂移或波動較大,可能是流動相有問題、色譜柱未平衡好或者儀器部件出現(xiàn)故障等,需要及時排查原因并解決。當(dāng)樣品分離完成后,根據(jù)色譜圖進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析,識別各峰對應(yīng)的物質(zhì),并計算其含量等相關(guān)參數(shù)。
實驗結(jié)束后,先關(guān)閉泵,繼續(xù)用甲醇等合適的溶劑沖洗色譜柱15-20分鐘,以清潔色譜柱,防止樣品殘留對下次實驗造成干擾。最后,關(guān)閉二手島津液相色譜儀的電源,再關(guān)閉計算機(jī),妥善整理實驗臺面,為下次使用做好準(zhǔn)備。